Descripción
El Fab & F(ab)2 Fragmentación de la IgG de ratón con proteina A El kit está diseñado para la generación y el aislamiento de Fab y F(ab)2 fragmentos de IgG de ratón1 Moléculas.
El kit utiliza nuestro Ficin inmovilizado resina. La ficina (o Ficain) (~25,000Da) es una enzima cisteína proteasa (EC 3.4.22.3) aislada del látex de higo que tiene la actividad endopeptidasa para escindir las moléculas de inmunoglobulina G en la razón de la bisagra. La ficina tiene un rango efectivo de pH 4-9.5 con un pH óptimo de 6.5 y rompe enlaces que involucran aminoácidos aromáticos o sin carga.
La ficina se usa típicamente para escindir la IgG de ratón1 ya que esto es difícil de escindir con papaína y pepsina. En presencia de cisteína de 1-4 mM o 10-20 mM, la ficina genera F(ab′)2 y Fab fragmentos, respectivamente. La ficina inmovilizada es un reactivo conveniente para producir Fab y F(ab′)2 fragmentos, ya que evita la necesidad de eliminar la enzima ficina después de la digestión.
Después de la digestión de la ficina, los fragmentos se separan de la IgG no digerida y de los fragmentos grandes de Fc con la columna de centrifugado de proteína A (Cat. # 786-276, 786-277) o proteína G (cat. # 786-1276) suministrada. El Resina de proteína A o Resina de proteína G se une a las moléculas de IgG y Fc y a la Fab o F(ab′)2 se recogen rápidamente gracias al diseño en formato de centrifugado.
Además SpinOUT™ GT-600 Se suministran columnas de desalinización para garantizar que la muestra inicial de anticuerpos esté en condiciones óptimas para la fragmentación.
Funciones
La ficina inmovilizada garantiza que no haya contaminación enzimática de las digestiones
Optimizado para IgG de ratón1
Da como resultado Fab o F(ab) listo para usar2 fragmentos, con mayor rendimiento y pureza
Formato Spin para una purificación rápida
Contiene todos los reactivos esenciales
Dos prácticos tamaños de kit disponibles
Aplicaciones
Para la preparación y purificación de Fab o F(ab)2 fragmentos de IgG de ratón1 moléculas de anticuerpos.
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